pHIL-D2載體的詳細信息如下:
? pHIL-D2載體大小8,210 bp,是融合表達載體。
? 載體構建過程中,可供使用的單一限制性內切酶位點為EcoR I.
? 胞內表達蛋白基因。
? 在載體構建過程中,需要在基因上添加起始密碼子ATG。
? 畢赤酵母中利用HIS4進行篩選。
? 為了將基因插入GS115或KM71的AOX區, 使用SacI限制性內切酶線性化質粒(GS115中產生His+Mut+基因型,KM71中產生His+ MutS基因型)
?為了將基因插入GS115或KM71的His4區, 使用Sal I或者Stu I限制性內切酶線性化質粒(GS115中產生His+ Mut+基因型,KM71中產生His+ MutS基因型)
?將基因插入GS115的AOX1區域,需要使用Bgl II線性化質粒 (產生His+MutS基因型)。