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產品資料
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pDsRed2-1

如果您對該產品感興趣的話,可以
產品名稱: pDsRed2-1
產品型號:
產品展商: HZbscience
產品文檔: 無相關文檔

簡單介紹

pDsRed2-1的各批次質粒菌株發貨前均經過嚴格的多重驗證,如存在質量問題,請在收到產品的三個月內通知我司。收到pDsRed2-1后請短暫離心,取2μl轉化至對應感受態中,挑取單克隆重新提取質粒后使用。


pDsRed2-1  的詳細介紹

pDsRed2-1載體基本信息

載體名稱: pDsRed2-1
質粒類型: 無啟動子載體;熒光報告載體
高拷貝/低拷貝: --
啟動子:
克隆方法: 多克隆位點,限制性內切酶
載體大小: 4107bp
5' 測序引物及序列:  5'-AGCTGGACATCACCTCCCACAACG-3'
3' 測序引物及序列: --
載體標簽: 紅色熒光蛋白DsRed2
載體抗性: Kanamycin.html' target='_blank'>卡那霉素Kanamycin
篩選標記: 新霉素(Neomycin)
克隆菌株: TOP10, DH5α,HB101
宿主細胞(系): 真核細胞 & 原核細胞
備注: pDsRed2-1載體不含啟動子,將待研究的目的啟動子插入MCS區,用于研究啟動子及順式轉錄元件在細胞內的作用水平 。
產品目錄號: 632405
穩定性: 穩表達 或 瞬表達
組成型: --
病毒/非病毒: 非病毒

pDsRed2-1載體質粒圖譜和多克隆位點信息

pDsRed2-1載體圖譜



pDsRed2-1多克隆位點

pDsRed2-1載體特征

pDsRed2-1載體簡介

pDsRed2-1載體描述 pDsRed2-1 encodes DsRed2, a DsRed variant engineered for faster maturation and lower non-specific aggregation. Derived from the Discosoma sp. red fluorescent protein (drFP583; 1), DsRed2, like its progenitor DsRed1, contains a series of silent base-pair changes that correspond to human codon-usage preferences for high expression in mammalian cells (2). In addition to these changes, DsRed2 contains six amino acid substitutions: V105A, I161T, and S197A, which result in the more rapid appearance of red fluorescence in transfected cell lines; and R2A, K5E, and K9T, which prevent the protein from aggregating. (DsRed2 may, however, form the same tetrameric structure as DsRed1 [3].) In mammalian cell cultures when DsRed2 is expressed constitutively, red-emitting cells can be detected by fluorescence microscopy within 24 hours of transfection. Large insoluble aggregates of protein, often observed in bacterial and mammalian cell systems expressing DsRed1, are dramatically reduced in cells expressing DsRed2. The faster-maturing, more soluble red fluorescent protein is also well tolerated by host cells; mammalian cell cultures transfected with DsRed2 show no obvious signs of reduced viability—in those cell lines tested, cells expressing DsRed2 display the same morphology (e.g., adherence, light-refraction) and growth characteristics as non-transfected controls.

pDsRed2-1 is a promoterless DsRed2 vector that can be used to monitor transcription from different promoters and promoter/enhancer combinations inserted into the multiple cloning site (MCS). Sequences upstream of DsRed2 have been converted to a Kozak consensus translation initiation site (4) to increase translation efficiency in eukaryotic cells. SV40 polyadenylation signals downstream of the DsRed2 gene direct proper processing of the 3' end of the DsRed2 mRNA. The vector backbone contains an SV40 origin for replication in mammalian cells expressing the SV40 T antigen, a pUC origin of replication for propagation in E. coli, and an f1 origin for single-stranded DNA production. A neomycin-resistance cassette (Neor) allows stably transfected eukaryotic cells to be selected using G418. This cassette consists of the SV40 early promoter, the neomycin/kanamycin resistance gene of Tn5, and polyadenylation signals from the Herpes simplex virus thymidine kinase (HSV TK) gene. A bacterial promoter upstream of the cassette expresses kanamycin resistance in E. coli.

DsRed2 can be used as an in vivo reporter of gene expression. Promoters should be cloned into the pDsRed2-1 MCS upstream from the DsRed2 coding sequence. Without addition of a functional promoter, this vector will not express DsRed2. The recombinant DsRed2 vector can be transfected into mammalian cells using any standard transfection method. If required, stable transfectants can be selected using G418 (5). pDsRed2-1載體含有以下元件: MCS: 12–83
 Discosoma sp. human codon-optimized Red Fluorescent Protein (DsRed2) gene
Kozak consensus translation initiation site: 90–100
Start codon (ATG): 97–99; Stop codon: 772–774
 SV40 early mRNA polyadenylation signal
Polyadenylation signals: 926–931 & 955–960
mRNA 3' ends: 964 & 976
 f1 single-strand DNA origin: 1023–1478
(Packages noncoding strand of DsRed2.)
 Ampicillin resistance (b-lactamase) promoter
–35 region: 1540–1545; –10 region: 1563–1568
Transcription start point: 1575
 SV40 origin of replication: 1819–1954
 SV40 early promoter
Enhancer (72-bp tandem repeats): 1650–1723 & 1724–1795
21-bp repeats: 1799–1819, 1820–1840 & 1842–1862
Early promoter element: 1875–1881
Major transcription start points: 1871, 1909, 1915 & 1920 Kanamycin/neomycin resistance gene
Neomycin phosphotransferase coding sequences:
Start codon (ATG): 2003–2005; stop codon: 2795–2797
G→A mutation to remove Pst I site: 2185
C→A (Arg→Ser) mutation to remove BssH II site: 2531
 Herpes simplex virus (HSV) thymidine kinase (TK) polyadenylation signal
Polyadenylation signals: 3033–3038 & 3046–3051
 pUC plasmid replication origin: 3382–4025


Propagation in E. Coli
 Suitable host strains: DH5α, HB101 and other general purpose strains. Single-stranded DNA production requires
a host containing an F plasmid such as JM109 or XL1-Blue.
 Selectable marker: plasmid confers resistance to kanamycin (50 μg/ml) to E. coli hosts.
 E. coli replication origin: pUC
 Copy number: ≈500
 Plasmid incompatibility group: pMB1/Col E1

Red Fluorescent Protein (DsRed2)
 Excitation/Emission Maxima: 558 nm / 583 nm 

pDsRed2-1載體序列

hz-3877R Angiotensin III  血管緊張素III抗體
hz-8205R FAM129B  FAM129B蛋白抗體
hz-8206R FAM82A1/RMD2  微管動力調節蛋白2抗體
hz-8208R FAM50A  FAM50A蛋白抗體
hz-8209R FAM98B  FAM98B蛋白抗體
hz-8210R FAM91A1  FAM91A1蛋白抗體
hz-4147R ODF2/Cenexin1  精子尾部結構蛋白抗體
hz-8211R FAM84B/BCMP101  乳腺癌膜相關蛋白101抗體
hz-8212R TEF4/TEA domain family mhzber 2  轉錄增強因子TEF4抗體
hz-8213R FAM113A  FAM113A蛋白抗體
hz-8214R FAM21C  FAM21C蛋白抗體
hz-8215R FAM13C1  FAM13C1蛋白抗體
hz-8216R FAM161A  FAM161A蛋白抗體
hz-8217R FAM59B  FAM59B蛋白抗體
hz-8218R FAM59A  FAM59A蛋白抗體
hz-8219R FAM150A  FAM150A蛋白抗體
hz-8220R FAM151A  FAM151A蛋白抗體
hz-5530R phospho-ODF2(Ser796)  磷酸化精子尾部結構蛋白抗體
hz-8221R FAM153B  FAM153B蛋白抗體
hz-8222R FAM154A  FAM154A蛋白抗體
hz-8223R FAM155A  FAM155A蛋白抗體
hz-8224R FAM156A/TMhz2  跨膜蛋白29抗體
hz-8225R FAM160B1  FAM160B1蛋白抗體
hz-8226R FAM161B  FAM161B蛋白抗體
hz-8227R FAM164B  FAM164B蛋白抗體
hz-8228R FAHD2A  延胡索酰乙酰乙酸水解酶抗體
hz-8229R FAM101A  FAM101A蛋白抗體
hz-8230R FAM102B  FAM102B蛋白抗體

滬公網安備 31011702004356號

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